链霉菌产生的新型纤溶酶的纯化和性质的研究

从一株土壤链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐ．）Ｙ４０５的发酵液中通过硫酸铵分级盐析、２９０树脂脱色、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５凝胶过滤、ＤＥＡＥＳｅｐｈａｄｅｘＡ２５阴离子交换层析和ＬｙｓｉｎｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，获得一种新型的具有纤溶活性的蛋白酶ＳＷ１。每升发酵液中可获得４２ｍｇＳＷ１样品，回收率为１２０％，每毫克蛋白活力达２９５２３尿激酶单位，以发酵液作为起始，所获得样品纯度提高２３０６倍，ＨＰＬＣ检测纯度约为８３５％。ＳＷ１在ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳中是单肽链蛋白，分子量为３０ｋＤ，等电点为８５，测定其Ｎ端１７个氨基酸序列为Ａｒｇ／Ａｓｎ／ＰｈｅＰｒｏ／ＡｓｐＧｌｙＭｅｔＴｈｒＭｅｔＴｈｒＡｌａＩｌｅＡｌａＡｓｎＧｌｎＡｓｎＴｈｒＧｌｎＩｌｅＡｓｎ，Ｎ端第一和第二残基具有不均一性，根据氨基酸组成分析推算ＳＷ１由２６２个氨基酸组成。ＳＷ１的纤溶活性可被１０ｍｍｏｌ／ＬＰＭＳＦ、１ｍｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ和１ｍｏｌ／Ｌ赖氨酸完全抑制，表明ＳＷ１其赖氨酸结合位点与活性有关。ＳＷ１的纤溶活性在４～３７℃和ｐＨ４．０～９０具有较好?