PTHrP受体胞外区基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

ＰＴＨｒＰ（甲状旁腺激素相关蛋白，Ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｏｎｅｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ）与多种肿瘤的生物学行为有关，尤其对肿瘤的骨转移起重要作用。应用其可溶性受体阻断它的病理作用是一个非常值得研究的课题。从肾癌组织中提取ＲＮＡ，采用逆转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）方法获得ＰＴＨｒＰ受体Ｎ端胞外区５４３碱基对的带信号肽的ｃＤＮＡ片段。将其核苷酸序列与国外发表的资料相比，基因中第２６２位核苷酸由Ｔ变为Ｃ，相应密码子由ＴＡＣ变为ＣＡＣ，导致氨基酸变异，即由酪氨酸变为组氨酸。将获得的受体基因克隆到原核表达载体ｐＥＴ３ａ，在大肠杆菌得到高效表达，经ＥＬＩＳＡ证实表达产物可与ＰＴＨｒＰ特异性结合。体外生物学活性检测表明表达产物可阻断ＰＴＨｒＰ的生物学活性。