抗人黑色素瘤单链抗体基因在大肠杆菌中的融合表达

应用ＲＴＰＣＲ技术从分泌抗人黑色素瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞ＨＢ８７６０中克隆了抗体轻、重链可变区基因，用（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３连接肽基因将ＶＨ、ＶＬ连接成ＳｃＦｖ基因，并进行了序列测定。ＳｃＦｖ基因全长９２７ｂｐ，其中ＶＨ基因长３６０ｂｐ，编码１２０个氨基酸，ＶＬ基因长３２４ｂｐ，编码１０８个氨基酸。在大肠杆菌融合表达载体ｐＧＥＸ４Ｔ１中表达了ＧＳＴＳｃＦｖ融合蛋白，表达产量占菌体总蛋白的２９％。凝血酶消化后的产物具有黑色素瘤细胞结合活性。