重组免疫毒素IL3-PE38KDEL真核表达载体的构建

Construction of IL3-PE38KDEL fusion gene eukaryolic expression vector and its expression in pichia

目的:构建大肠杆菌-毕赤酵母表达载体Ppic9k-IL3-Linker-PE38KDEL。方法:用PCR的方法扩增所需要的目的片段IL3及PE38KDEL,再通过酶切和连接的方法定向克隆到载体Ppic9k-Linker中,得到融合基因Ppic9k-IL3-Linker-PE38KDEL。重组载体经酶切,菌落PCR鉴定,DNA序列分析插入片段完全正确。结果:经限制性内切酶酶切鉴定,菌落PCR及DNA序列分析表明重组表达载体Ppic9k-IL3-Lin-ker-PE38KDEL构建成功。结论:成功地构建融合基因IL3-PE38KDEL的毕赤酵母表达载体,为后续的蛋白质的表达、纯化及功能研究奠定基础。

AIM： To construct a eukaryolic expression plasmid of Ppic9k-lL3-Linker-PE38KDE. METHODS： The IL3 and PE38KDEL gene were amplified by polymerase chain reaction （PCR） and cloned into the eukaryolic expression plasmid Ppic9k-Linker constructed after being sequenced.