H22荷瘤小鼠免疫功能状态的初步研究

目的:恶性肿瘤可通过多种途径逃避免疫监视,并抑制机体的免疫功能,促进肿瘤发生发展。为了探讨恶性肿瘤对机体免疫功能的影响,本研究观察H22荷瘤小鼠的免疫功能状态,为临床肝癌患者的免疫功能变化及其在肝癌发生发展中的作用提供一定的理论参考。方法:实验动物:BALB/C小鼠,雌性,8周龄,体重16-18g。采用MTT法检测实验组织和对照组小鼠脾淋巴细胞增殖情况。采用免疫组化S-P法检测实验组和对照组小鼠脾淋巴细胞PCNA的表达,采用流式细胞仪检测小鼠经ConA刺激后的脾淋巴细胞表面活化分子CD69的表达情况。采用流式细胞仪检测小鼠经ConA刺激后脾淋巴细胞细胞周期变化。结果:荷瘤小鼠的H22腹水瘤成瘤率为100%,平均体重(32.03±3.44)g,明显高于正常对照组(19.15±1.14)g(T=7.12,P<0.01),自接种腹水瘤的当天和接种后第3天开始每天测量实验组和对照组小鼠的体重变化,可见实验组小鼠体重变化随时间推移呈对数增长,而对照组呈平缓增长,实验组明显高于对照组(F=63.5,P<0.05)。MTT法检测结果显示,实验组小鼠脾淋巴细胞转化率(98.70%)显著低于正常对照组(140.32%)(P<0.05)。免疫组化S-P法检测小鼠脾脏红髓、白髓淋巴细胞PCNA染色阳性率,结果显示,实验组小鼠红髓淋巴细胞PCNA染色阳性率(31.00%)明显低于正常对照组(64.30%)(T=7.38,P<0.01);实验组白髓淋巴细胞PCNA染色阳性率(17.90%)明显低于正常对照组(42.20%)(T=6.38,P<0.01),流式细胞仪检测结果显示,实验组小鼠脾淋巴细胞表面活化分子CD69的表达率(65.30%)显著低于对照组(76.21%)(T=15.81,P<0.01),流式细胞仪检测结果显示,实验组G2-M期和S期的脾淋巴细胞分数(28.28%)明显低于对照组(44.52%)(T=15.81,P<0.01)。结论:H22肝癌荷瘤小鼠脾淋巴细胞活化后细胞增殖活性降低,H22肝癌荷瘤小鼠脾淋巴细胞表面活化分子CD69的表达率降低,H22肝癌荷瘤小鼠的免疫功能受到抑制。