激光共聚焦显微镜对反义VEGF寡核苷酸转染TE-1及SKOV3细胞系的荧光检测

Detection of TE-1 and SKOV3 Cancer Cells after Transfecting Antisense VEGF by Laser Scanning Confocal Microscopy

[目的]应用激光共聚焦显微镜检测转染至食管癌TE-1细胞及卵巢癌SKOV3细胞内反义VEGF寡核苷酸上荧光物质含量及转染对细胞凋亡的影响。[方法]传代培养食管癌TE-1细胞及卵巢癌SKOV3细胞,取VEGF反义寡核苷酸,按0.1μmol/L组、0.3μmol/L组及0.5μmol/L组转染两种细胞,正义寡核苷酸0.3μmol/L同时转染作为对照。激光共聚焦显微镜观察VEGF寡核苷酸转染荧光图像,比较反义VEGF寡核苷酸的不同浓度在两种细胞摄入情况。流式细胞术检测不同浓度转染两组细胞的凋亡差异。[结果]食管癌TE-1细胞及卵巢癌SKOV3细胞不同浓度寡核苷酸转染24h荧光强度分别为32.69±2.94、51.48±5.76、56.62±1.2和72.56±2.01、96.42±3.21、98.54±2.07,两组荧光强度与对照组相比均有显著性差异(P<0.01),TE-1细胞及SKOV3细胞0.3μmol/L组及0.5μmol/L组之间荧光强度无显著性差异。TE-1细胞各浓度组凋亡指数较对照组有显著差异,而SKOV3细胞中凋亡指数较对照组无显著性差异。[结论]激光共聚焦显微成像技术能进行活细胞水平转染效率的定量检测,对选择合适转染浓度有帮助,提示不同癌细胞使用相同浓度抗血管生成药物可能效果有差异。