摘要
目的:利用基因重组方法构建出含有抑癌基因 P16, P53的融合表达载体。方法:用限制性内切酶 Eco R I、 Xho I双酶切 P16 A,用 Nhe I、 Xho I双酶切 P M A M neo53。采用低熔点琼脂糖凝胶挖块回收法回收 P16、 P53基因片段,片段长度分别为800 bp、1 800 bp。分别经抽提、沉淀、漂洗,使基因片段进一步纯化。利用定向克隆技术将 P16、 P53基因片段顺向插入经 Eco R I、 Xho I双酶切后的pc D N A3,再次转化后经快速鉴定筛选出 pc D N A1653融合表达载体。结果: P16、 P53的融合表达载体大小8 000 bp、插入方向为正向。结论:用基因重组技术可以将两个抑癌基因构建在一个表达载体中进行表达,这为利用多基因治疗肿瘤的基础研究与临床研究提供了前提条件。
出处
《白求恩医科大学学报》
CSCD
1999年第4期369-370,共2页
Journal of Norman Bethune University of Medical Science