柴胡桂枝汤对SE大鼠IRE1、CHOP蛋白表达的影响

目的:观察柴胡桂枝汤对癫痫持续状态(statusepil epticus,SE)大鼠内质网应激IRE1信号转导通路前存活分子IRE1mRNA与前凋亡分子CHOP蛋白在大鼠海马区表达的变化及该区域神经元细胞凋亡情况。方法:采用氯化锂-匹罗卡品制作SE模型,将90只SD大鼠随机分为对照组、SE组、药物组3组,每组按照SE后2h、4h、8h、24h、72h五个时间点分为5个亚组。应用原位细胞凋亡检测法(TUNEL法)观察海马区神经元细胞凋亡数、用RT-PCR检测SE后海马IRE1mRNA的表达,用免疫组织化学法检测CHOP蛋白表达。结果:①SE组8～72h时间点TUNEL阳性细胞数多于对照组(P<0.01),其阳性细胞数随惊厥持续时间延长而增加。药物组8～72h时间点TUNEL阳性细胞数较SE组明显减少(P<0.05)。②对照组IRE1mRNA有少量表达;SE组IRE1mRNA的表达于SE后4h表达量为最高,随后逐渐下调;其4h,8h,24h时间点较对照组有显著差异(P<0.01)。药物组4h,6h,24h时间点海马区IRE1mRNA的表达明显高于SE组,差异有显著性(P<0.05)。③对照组未见CHOP阳性细胞,SE组于2h后在海马区可见CHOP阳性细胞,随时间的延长阳性细胞数逐渐增多,于24h达到高峰,之后逐渐下降;SE组CHOP阳性细胞数与对照组比较,两者有显著差异(P<0.01)。药物组各个时间点CHOP数量表达明显少于SE组,两者有显著差异(P<0.01)。结论:柴胡桂枝汤可能通过减少SE对内质网的刺激,上调前存活分子IRE1的表达,下调前凋亡分子CHOP的表达,减轻异常放电对脑组织的病理损害,发挥对神经元的保护作用。