插入烟草叶绿体启动基因片段的重组质粒转化大肠杆菌和枯草杆菌感受态与原生质体的比较

大肠杆菌(E.coli)N100携带的pK01-26质粒插入烟草(Nicotiana tobacHm var.)叶绿体启动基因片段的重组质粒。该质粒以大肠杆菌HB101为受体可以再转化,转化频率为4.93×10^(-6),以枯草杆菌168为受体不能实现转化。上述两种受体菌株的原生质体,经处理,再生细胞壁后,分别获得转化子。经原生质体转化,以大肠杆菌HB101为受体的转化频率为2.7×10^(-4),而枯草杆菌168为受体也能转化,转化频率为2.6×10^(-5)。以HB101为受体的转化子在麦康凯半乳糖选择平板上呈红色菌落。证明pKO1-26质粒在新受体中叶绿体启动基因仍可启动半乳糖激酶基因表达。获得的转化菌株经测定,以HB101为受体的,遗传性稳定;而以168为受体的,部分菌株遗传性稳定。