正常人外周血嗜酸性粒细胞的分离与培养方法的改进

目的：探讨外周血嗜酸性粒细胞（Eos）纯化、分离与培养的方法。方法：采用Percoll密度梯度（1．082～1．100）分离外周血Eos，离心前细胞悬液预先与fMLP37℃孵育10min。纯化的Eos分别在加入或不加入细胞因子（IL－3、IL－5和GM－CSF）的条件下培养，观察细胞活力的变化。结果：传统Percoll密度梯度分离Eos的纯度和回收率分别为（15．8±53）％和（64．3±6．4）％。预先用fMLP孵育Eos使分离Eos纯度（96.5±1．8％）显著增高（P<0.01），回收率（68．4±71）％无明显变化（P>0.05）。Eos体外培养存活2～3d，加入细胞因子可使Eos存活时间延长6d以上。结论：fMLP可有效增加Percoll密度梯度分离Eos的纯度。分离的EoS可用于体外培养。