普罗布考对氧化型低密度脂蛋白诱导的人树突状细胞免疫功能成熟的影响及作用机制

目的观察药物普罗布考及血红素加氧酶1小干扰RNA(HO-1 siRNA)干扰后对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人单核细胞源性树突状细胞(DCs)免疫功能的影响,探讨普罗布考抗动脉粥样硬化的潜在机制。方法分离人外周血单核细胞,加入rhGM-CSF和IL-4促其分化为未成熟DC,随机分不同组别于予普罗布考(50 mg/L),低密度脂蛋白(LDL)或ox-LDL 50mg/L干预后,流式细胞术检测DC表型平均荧光强度(MFI)值,FITC-Dextran检测DCs吞噬功能,ELISA检测细胞培养上清液细胞因子(IL-4,TNF-α)浓度,Western blot分析STAT1、phosphoTyr 701 STAT1、HO-1的表达情况。结果 (1)ox-LDL干预组DCs的MFI值(CD1a、CD40、CD86、HLA-DR)显著升高,吞噬功能减弱,促炎因子TNF-α升高,抗炎因子IL-4降低;普罗布考干预组较未干预前MFI值均有降低,吞噬功能升高,TNF-α降低,IL-4升高,差值以ox-LDL干预组最显著(P均<0.05)。(2)HO-1 siRNA干扰后普罗布考组较单纯普罗布考干预组MFI值升高,吞噬功能减弱,TNF-α升高,IL-4降低(P<0.05);Westernblot提示HO-1 siRNA干扰后DCs内Stat1表达减弱,STAT1701磷酸化表达增强。结论 ox-LDL是DCs免疫功能成熟的重要刺激因素,而普罗布考对ox-LDL诱导的DC的免疫成熟有一定的抑制作用,且与HO-1、STAT1/CIITA信号转导通路有相关性,提示这可能是其抗动脉粥样硬化的潜在机制。