摘要
克隆啤酒酵母鲨烯合酶基因及构建其基因表达载体，为在微生物体内重建青蒿素合成途径打下基础。采用聚合酶链反应（PCR）扩增、扩增片段与T载体连接和克隆片段的序列分析；酶切并回收目的基因，反向插入酵母表达载体pGAPZαA，双酶切鉴定重组子。通过PCR扩增获得1335bp片段，克隆后经PCR和酶切反应进行了鉴定。初步测序结果与GenBank上已登录的酵母鲨烯合酶基因序列基本吻合，相差仅数个碱基对；将此片段反向插入酵母表达载体pGAPZαA，构建了反义酵母表达载体，并通过双酶切加以鉴定。成功克隆了啤酒酵母鲨烯合酶基因并进行了测序，同时构建了反义酵母表达载体。
