不同剂量重组人骨形态发生蛋白2对人成骨肉瘤细胞系SaOS－2成骨活性的影响

Effect of different doses of recombinant human bone morphogenetic protein 2 on osteogenic activities of human osteosarcoma cell line SaOS-2

目的 探讨不同剂量的重组人骨形态发生蛋白2（rhBMP-2）对人成骨肉瘤细胞系SaOS-2成骨活性的影响.方法 将体外培养的SaOS-2细胞分别暴露于0（对照）、2、20、200μg/L的rhBMP-2中,培养12、24、48 h后,以实时荧光定量PCR方法测定SaOS-2细胞碱性磷酸酶（ALP）和骨钙素（BGP）mRNA的表达水平.结果 SaOS-2细胞ALP和BGP mRNA表达量随rhBMP-2刺激剂量的增加呈上升趋势.20μg/L rhBMP-2作用48 h（1.60±0.64）和200 μg/L rhBMP-2作用12、48 h（1.70±0.41、1.80 ±0.19）SaOS-2细胞ALP mRNA 相对表达量较同一时间段对照组（12、48 h分别为0.80±0.25、0.74±0.21）明显升高（P均〈0.05）.2μg/LrhBMP-2作用24 h（1.67±0.33）、20μg/L rhBMP-2作用12、24 h（2.42±0.13、1.82±0.14）和200 μg/L rhBMP-2作用12、24 h（1.46±0.11、1.24 ±0.07）SaOS-2细胞BGP mRNA相对表达量较同一时间段对照组（12、24 h分别为1.01±0.14、0.84±0.12）明显升高（P均〈0.05）.结论 rhBMP-2能明显刺激SaOS-2细胞ALP、BGP mRNA表达升高,并呈现剂量一效应关系,但表现的剂量特征不同.

Objective To investigate the effect of recombinant human bone morphogenetic protein 2 （rhBMP-2） on the osteogenic activities of human osteosarcoma cell line SaOS-2. Methods SaOS-2 cells were exposed to rhBMP-2 for 12,24,48 h at 0（control） ,2,20,200 μg/L, respectively. The mRNA expression of alkaline phosphatase（ALP） and bone gla（BCP） were detected by real time polymerase chain reaction. Results The mRNA expression of ALP and BGP of SaOS-2 cells increased gradually with rhBMP-2. The mRNA expression of ALP of the 20 μg/L group exposed for 48 h（1.60 ± 0.64）, and the 200 μg/L group exposed for 12,48 h（1.70 ± 0.41, 1.80±0.19） were significantly higher than those of control （12 h： 0.80±0.25, 48 h： 0.74±0.21, allP〈0.05）. The mRNA expression of BGP of the 2 μg/L group exposed for 24 h（1.67 ± 0.33）, the 20 μg/L group exposed for 12,24 h（2.42 ± 0.13,1.82 ± 0.14） and the 200 μg/L group exposed for 12,24 h（1.46 ± 0.11,1.24 ± 0.07） were significantly higher than those of control（ 12 h： 1.01 ± 0.14, 24 h： 0.84 ± 0.12, all P〈 0.05）. Conclusions rhBMP-2 can promote the mRNA expression of ALP and BGP of SaOS-2 cells. They have a dose-response relationship, but represent a different dose-response effect.