短C肽人胰岛素原突变体的设计与其编码基因的套叠PCR合成

基因工程人胰岛素作为第一个基因工程药物，自其使用以来解决了许多糖尿病人的疾苦。其后开展的一系列基因工程人胰岛素突变体的研究，发现了一些或长效或速效或高活性的突变体，丰富了治疗用胰岛素的类型。本文根据NCBI数据库中人胰岛素原的一级结构与三级结构模型，设计了-C肽被缩短至4个氨基酸残基（GPGA）的胰岛素突变体，期望该短连接肽在不去除的情况下维持胰岛素活性。依据大肠杆菌K12的密码子偏好性，设计了适宜大肠杆菌表达的该突变体的基因序列。利用套叠PCR方法扩增并克隆了该突变体基因。核苷酸序列测定结果表明，所克隆的突变体基因与设计的核苷酸序列存在2个碱基差异，但是氯基酸序列保持一致。