冷冻保存绵羊精子质膜完整性检测的研究

为了探讨冷冻保存对绵羊精子质膜完整性的影响,研究采用低渗肿胀—伊红拒染(HOS-EY)法检测冷冻保存前后绵羊精子质膜的完整性。实验设计了5个HOS-EY低渗染液浓度梯度组合(110、130、1501、70、190mOsm),按精子尾部肿胀与否和头部着色与否区分为4种类型进行统计。结果表明:绵羊冻融精子头膜尾膜均完整的Ⅳ型精子率(22.36%)和头膜尾膜均损伤的Ⅰ型精子率(47.4%)与鲜精比较分别极显著减少(58.64%)和增多(20.94%)(P<0.01),表明冷冻-解冻过程对精子膜造成严重损伤;头膜损伤-尾膜完整的Ⅱ型精子率(28.82%)在冷冻过程中极显著增多(16.72%)(P<0.01),头膜完整-尾膜损伤的Ⅲ型精子在冷冻组发生率(1.72%)显著减少(2.58%)(P<0.05),表明精子头膜或尾膜的损伤是独立发生的,且头膜损伤易于尾膜,5种HOS-EY低渗染液中150 mOsm组对精子尾部肿胀的检测效果最好。