禽流感病毒8质粒拯救系统的构建

目的构建禽流感病毒8质粒拯救系统,为流感病毒的不同亚型的拯救做铺垫。方法将H4和N6基因克隆到phw2008双向转录/表达载体上,与已经构建好的phw2008-PA、phw2008-PB2、phw2008-PB1、phw2008-NP、phw2008-NS、phw2008-M,组成8质粒拯救系统。结果用限制性内切酶Bsmb I切割PGH-H4、PGH-N6,得到两条条带,大小分别为1 700 bp、1 500 bp。用限制性内切酶Bsmb I酶切双向转录/表达载体phw2008,电泳后得到1条为2 980 bp的条带。将酶切鉴定phw2008-H4、phw2008-N6,得到两条大小为2 800和1 800 bp的条带。结论本实验成功获取了目的基因片段H4及N6,并且成功的连接到双向表达载体上,与现有的其他6质粒构成了经典的拯救系统,为了以后病毒拯救创立了有利的条件。