P^(53)、mdm2和neo基因探针的制备与应用

为研究P^(53),mdm2基因在肿瘤细胞中的表达与调控作用,将克隆于质粒载体中的P^(53),mdm2和neo基因分别用双酶切得到P^(53),mdm2,cDNA和neo基因片段,采用地高辛随机引物法标记探针,用于转染含P^(53)和mdm2基因的肺腺癌GLC-82细胞中DNA和RNA斑点杂交,以及肿瘤细胞中P^(53)和mdm2基因的检测。结果显示,以neo基因为探针的DNA斑点杂交中转染P^(53)和mdm2的细胞出现阳性信号,GLC-82亲本细胞为阴性,表明转染成功。以P^(53),mdm2,cDNA为探针的RNA斑点杂交中转染P^(53)和mdm2的细胞出现阳性信号,提示P^(53)和mdm2在细胞中获得表达。地高辛标记探针具有简单、快速、特异性强、灵敏度高、无污染等特点,有推广应用价值。