脆性X智力低下一号基因启动子双荧光素酶报告基因的构建及活性测定

目的构建脆性X智力低下一号基因启动子双荧光素酶报告基因,并检测启动子活性。方法从K562细胞中钓取启动子片段MSE,然后与pGL-4载体连接,鉴定后转染hela细胞,检测其启动子的活性。结果从K562细胞中成功钓取了启动子片段MSE,将MSE与PGL4载体连接成重组质粒pGL-4/MSE位,重组质粒经过PCR、酶切鉴定后测序,测序结果与GeneBank报道序列一致。重组质粒pGL-4/MSE位转染hela细胞的相对荧光素酶值与阴性对照组相比有明显区别(P<0.05)。结论成功构建了脆性X智力低下一号基因启动子双荧光素酶报告基因,并具有满意的活性,为后续研究发病机制及作用位点提供依据。