香菇菌丝原生质体分离与再生条件的研究

Studies on the Conditions of Isolation and Regeneration of Protoplasts from Mycelia of Leniinus edodet

在25—26℃下培养5—6天的菌丝体,以0.8mol/L甘露醇作为渗透压稳定剂,用1.5％溶壁酶液酶解1.5—2小时,所得原生质体的产量较高,最高可达4×10~7个/ml以上。上述条件分离的原生质体,再生率也较高。原生质体再生的温度以26℃为最佳。不同的再生培养基明显地影响原生质体的再生率。在完全培养基中加入麸皮浸出液可显著提高香菇菌丝原生质体的再生率,其中,以添加5％麸皮浸出液的效果最好。显微观察结果表明,在液体培养基中,香菇菌丝原生质体的再生是不同步的。一般要培养20小时以后才能见到出芽,而且原生质体的再生形式也是多种多样的。