一种竞争性HCV定量方法的建立及其应用

目的:建立检测丙型肝炎病人血清HCV RNA水平的竞争性定量方法。方法:采用含HCV5＇非编码区(5＇NCR)缺失突变重组质粒5Tld,将前期目的基因亚克隆进体外转录载体pCDNAI,获得特录重组体5Tld＇。线性化后用SP6 RNA聚合酶体外转录竞争性缺失突变模板RNA,定量后与血清HCV RNA一起作逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),建立检测血清HCV RNA水平的竞争性定量方法。结果;检测15例丙肝病人20份血清,滴度为6.6×10^(12)～6.6×10~6拷贝/ml,经干扰素治疗后病毒水平下降1～5个log,年龄<20岁者干扰素治疗效果较好。结论:竞争性逆转录聚合酶链反应是一种较好的检测HCV RNA水平的定量方法。