银染PCR-SSCP检测粪便抑癌基因突变的研究

目的早期诊断及治疗是提高结、直肠癌疗效的关键．本文旨在探讨从粪便中检测基因突变、为结、直肠癌患者提供一种无创伤性筛查方法的可行住。方法0．5克粪便与粪便DNA提取液（0.5mol／LTris-HC1，0．1％SDS,16mmol／LEDTA，15mmol／LNaCI，100μg／mlProteinaseKPH9．0）37℃反应过夜，经过常规酚-氯仿-异戊醇抽提，得到DNA。粪便DNA经过PCR扩增，8％银染非变性聚丙烯酰胺凝胶（丙烯酰胺:甲叉丙烯酰胺＝29:1）检测抑癌基因点突变。结果45例结、直肠癌患者中，男25例，女20例，年龄28～81岁．高分化癌15例．中分化癌18例．低分化癌12例：Dukes分期中A期15例．B期16例．C期9例，D期5例；淋巴结转移14例，无淋巴结转移31例。正常肠粘膜组织为对照组。粪便APC及／或MCC基因突变28例（62．2％），占突变组织93．3％（28／30例）；单基因突变：APC基因21例（46．7％）．其中第11外显子16例（37．8％），第15G外显子6例（13．3％）．MCC基因11例（24．4％），粪便APC及MCC基因突变分别占突变组织91．3％及84．6％；17例肿瘤组织中未发现基因改变患者粪便中均没有检测到基因突变。粪便中基因突变与肿瘤组织学类型、Dukes分期、淋巴结转移、粪便潜血是否阳性及有无便血史、肿块大小、病灶部位及肿瘤形态统计学上?