应用反转录聚合酶链反应检测鸡传染性支气管炎病毒核酸的研究

根据国外报道的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)Gray 株的纤突蛋白(S_1)核苷酸序列,自行设计合成了 S_1蛋白主要抗原决定簇基因两侧的一对引物,跨幅为1.0kb。用该引物对从内蒙古、天津、山东等地分离的三株 IBV 进行 RNA 提取,反转录后PCR,经琼脂糖凝胶电泳结果表明,三个毒株均获得了与预期一致的 PCR产物;此外,IBVPCR 灵敏度的测定结果表明,PCR 方法可检测出10pg 的模板,PCR 酶切结果为,Haelll、Tatl 酶对三株 PCR 产物均有一个酶切位点,而 MsPl 酶无酶切位点。