IBV S_1基因的RT—PCR方法的建立

中国农科院哈兽研所生物室的科技人员在鸡传染性支气管炎病毒（IBV）S1基因的RT—PCR扩增中,摸索出一种较为理想的方法。含IBV鸡胚尿囊液经梯度离心浓缩后,应用SDS—蛋白酶K裂解,酚—氯仿抽提、乙醇沉淀,吹干后用PH8.0TE溶解病毒RNA。取适量的TE溶解物用于反转录（RT）,将RT产物用于PCR。PCR的循环条件为95℃5’,94℃1’,45℃1’,72℃ 2’,循环30次,最后延伸10’。该方法较为简便,省时,得到的扩增产物足够用于酶切分析。