畜禽衣原体病补体结合反应抗原与阴、阳性血清研制总结报告

应用改良氏法制成畜禽衣原体病补结合反应抗原,与衣原体阳性血清和阴性血清进行补体结合反应,抗原效价达到1:256以上,阳性血清滴度1:256,阴性血清无反应。抗原与阴、阳性血清在4℃可保存两年。经七年推广应用证明,这种诊断济特异性强、效价高、稳定。经与澳大利亚的同类制品相比较,具有相同的反应活性。产品质量达到国际水平。近几年来,我国已相继诊断出了牛、羊、猪和禽类的衣原体病,随着集约化饲养技术的发展和进出口贸易日趋扩大,积极开展衣原体病的诊断、检疫和防治已势在必行。在进行衣原体病血清学诊断和新菌株抗原性鉴定时,补体结合反应仍然是各国学者所公认的重要手段。然而,迄今为止,我国尚无标准的补体结合反应抗原与阴阳性血清及其规范化的检疫技术操作规程。长期以来,动物衣原体病口岸检疫制剂一直依赖进口。因此积极开展这方面的研究,尽快研制出标准的诊断液和其规范化检痰技术,为开展衣原体病的诊断和防冶提供手段,已成当务之急。制备衣原体病补体结合反应抗原的方法较多,Bdeson(1933)首先用感染小白鼠的脾、肺制备抗原,并发现衣原体有耐热和不耐热二种抗原成份。稍迟,Njgg 等(1946),Lipine 和 Sauter(1951),Mayer(1954)以感染鸡胚卵黄囊膜为材料,采取煮沸、离心法制成抗原。Christensen 和 Volkert(1955)用乙醚处理10%感染鸡胚卵黄囊膜悬液提取抗原,再以热丙酮处理来消除其抗补性。Te-rzin(1961)用超速离心浓缩的原生小体煮沸处理后,再以乙醚抽提法制取。Gynlai 等(1969)将感染鸡胚尿囊液离心浓缩后再以超声波裂解,制成了高效价的抗原。Wen-(1 959)、Jenkin等(1 961),(1 973),Page(1975)等用去氧胆酸钠和胰蛋白酶处理纯化的衣原体制备抗原。这些方法都可得到衣原体属特异性抗原,但却存在着制造工艺复杂或抗原质量不稳定等弊病,只能在实验室内小批量生产。等(1975)报导了用十二烷基硫酸钠法批量生产高质量抗原的方法。我们在抗原研制过程中,将几种方法作了比较,证明氏法有许多可取之处,以此为基础,我们吸收了其他方法的一些优点,对其工艺流程作了改进,终于研制成功了特异好性、效价高、稳定的高质量衣原体补体结合反应抗原。许多研究者用衣原体多次感染豚鼠、兔、鸽、公鸡和孕羊等动物,都得到了高效价的免疫血清。为清除血清中非特异性抗体的干扰,有的还使用了免疫吸咐剂。鉴于衣原体的免疫原性低和供免疫动物的抗原中,鸡胚组织成份一时难以清除干净等问题,我们在分析比较了一些制备诊断血清的免疫方法和免疫程序的优缺点后,用较纯化的衣原体免疫接种不同的动物,制备了多种畜禽免疫血清,经用免疫吸附剂处理除去非特异性免疫成份后,成为特异性较高的衣原体诊断血清。研究表明,我们研制的衣原体病补体结合反应抗原与阴、阳性血清质量稳定,特异性强,可以用作畜禽衣原体病的血清学调查、动物进出口检疫和新分离菌株血清学鉴定用,并适宜于工厂化生产,现将研究结果报告如下: