siRNA抑制人黑色素瘤A375细胞株VEGF的表达及细胞增殖

目的研究小干扰RNA(siRNA)对人黑色素瘤A375细胞血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的抑制作用及对癌细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡的作用。方法设计并合成特异性靶向人VEGF基因的siRNA,通过脂质体转染到A375细胞中。RT-PCR检测siVEGF对VEGF基因表达的抑制作用;MTT法检测siVEGF对癌细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测siVEGF诱导细胞凋亡的作用。稳定转染的肿瘤细胞株接种于裸鼠皮下,观察肿瘤细胞成瘤情况。结果转染siVEGF1和siVEGF2组VEGF mRNA表达水平与空白对照组比较分别下调了59.92%和69.63%,转染阴性对照质粒组VEGF基因表达水平都无明显改变。转染siVEGF1和siVEGF2的细胞增殖受到抑制,增殖抑制率具有时间依赖性,细胞的凋亡率分别为33.8%和41.1%。转染SiVEGF2的A375细胞成瘤率平均为66.7%和50%,而对照组成瘤率均为100%。结论构建的siRNAVEGF能有效抑制人黑色素瘤A375细胞增殖及成瘤率,诱导其凋亡,其机制可能与其特异性有效下调VEGF基因的表达有关。