重组质粒pBI190的构建

利用质粒pBI121为载体,通过对其酶切位点的改造,引入一个目的基因(204 bp),构建成一个新的质粒pBI190。方法:用Sac I和Xba I分别对质粒pBI121进行酶切,0.8%低熔点琼脂糖凝胶电泳回收所需片段,将已知DNA片段用引物进行PCR扩增后,使用T4 DNA连接酶将上述得到的DNA片段与酶切回收的质粒pBI121 DNA进行连接。结果:将连接产物转化大肠杆菌DH5α及筛选与测序公司进行鉴定,最终符合目的要求。结论:本实验将质粒pBI121进行了改造,构建了新的表达载体pBI190,并且分析了实验过程中遇到的相关问题。