百合ISSR-PCR反应体系的优化

为优化百合ISSR-PCR反应体系,利用正交试验设计,对百合ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素进行优化筛选。结果表明:优化的25μL百合ISSR-PCR反应体系为dNTP 0.2 mmol/L、Mg2+2.0 mmol/L、引物0.5μmol/L、模板DNA 60 ng和Taq酶1.0 U,最佳退火温度为52.2℃。该体系以38个品种(种)百合进行扩增验证,得到的条带清晰、多态性高,且具有良好重复性。说明优化的百合ISSR-PCR反应体系适用于百合资源的品种(种)鉴定及遗传多样性研究。