用根癌农杆菌离体转化柑桔

由椪柑试管实生苗切取的外植体同根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的野生型菌株B_6S_3在28±1℃且黑暗的条件下共培养,3天后,将感染的外植体置于附加500mg/l羧苄青霉素的无激素MT培养基上。2周后,叶片、茎段和子叶产生出瘤组织,频率分别为60.0％、4.6％和20.8％,而对照不产生瘤组织。通过在无激素培养基上的生长和章鱼碱的产生鉴别和确认转化组织。结果证明,T-DNA编码的激素合成酶基因和章鱼碱合成酶基因已在碰柑转化组织中得到了转移和表达。