纳米PCR技术检测溶藻弧菌的建立与初步应用

本研究根据溶藻弧菌(VA)的特异性基因toxR基因序列,应用primer6.0设计了1对特异性引物,并建立了纳金米金PCR方法,并对该方法的最佳反应条件、特异性和灵敏度进行了测定,采用2.0%琼脂糖电泳进行检测,结果表明本实验能扩增得到与实验设计相符的159bp(VA)的特异性条带;与副溶血弧菌、霍乱弧菌、麦氏弧菌、沙门氏菌、枸橼酸杆菌无交叉反应;纯培养细菌检测灵敏度可达22cfu/反应体系,同条件下比普通PCR的灵敏度高10倍。经临床检测,从120份带鱼、鱿鱼和鱼粉中检出8份阳性样品,与常规细菌分离鉴定方法符合率100%。本试验方法的建立对于加强进出口水产品中VA的检验检疫具有十分重要的意义。