超速玻璃化法冻存小鼠肝细胞球形聚集体的初步研究

现有的肝细胞冻存法是将分散的肝细胞用于冻存.从肝组织消化分离的肝细胞,其细胞完整性和功能都会受影响.有报道用肝细胞球形聚集体培养,效果优于用分散肝细胞培养[1].玻璃化法冻存细胞组织,由于不形成冰晶,对细胞损伤较小,已成功用于冻存胚胎、卵巢、胎肝组织和脑细胞[2-5].本研究将小鼠肝细胞预培养成球形聚集肝细胞,用改进的超速玻璃化法冻存,解冻后与含胶原培养液混合、培养,通过检测培养上清液中ALT、AST、乳酸脱氢酶（LDH）浓度判断肝细胞受损漏出情况,检测白蛋白（ Alb）浓度判断肝细胞合成功能.对照组用单层贴壁培养分散肝细胞做同样冻存和检测.