单链尿激酶型纤溶酶原激活剂单克隆抗体的制备及应用

用 99%纯度的单链尿激酶型纤溶酶原激活剂 (scuPA )免疫BALB/c小鼠制备了 4株能稳定分泌抗scuPA的IgG1类单克隆抗体 (McAb )的杂交瘤细胞系G7、E8、D1和A9。检测了这四株单抗的特异性 ,它们与组织型纤溶酶原激活剂 (t PA )无反应 ,与双链尿激酶型纤溶酶原激活剂 (uPA )的结合力很弱。其中G7细胞株单抗与单、双链结合的差异最大。取纯化G7单抗制备亲和层析柱。用此柱直接从培养上清纯化scuPA ,得到的scuPA纯度为 96 3% ,回收率为 85 4% ,纯化倍数 5 0倍左右 ,比活 1 2 9× 10 5。纯化方法简单、操作方便、避免了因步骤繁杂造成的scuPA的降解 ,同时降低了成本。