焦磷酸测序和双脱氧测序法检测结直肠癌患者K-ras基因突变的对比研究

A Comparison Between Pyrosequencing and Dideoxy Sequencing for K-ras Mutation Detection in Patients with Colorectal Cancer

[目的]探讨不同方法学对结直肠癌K-ras基因点突变检测结果的影响。[方法]对60例结直肠癌患者石蜡包埋组织样本进行K-ras基因第12、13位密码子突变检测,检测分别采用焦磷酸测序法及双脱氧测序法,并对结果进行对比分析。[结果]两种方法都能够检测到常见的突变类型,但由于两种方法的灵敏度不同,检出率焦磷酸测序法高于双脱氧测序,分别为33.3%(20/60)和25%(15/60)。经病理对肿瘤细胞比例分析发现,5例双脱氧测序法漏检标本中,肿瘤细胞比较少,不足20%。[结论]K-ras基因突变的检测过程中,标本肿瘤细胞的比例是影响结果的关键因素,检测前需要对标本进行病理评估,确保肿瘤细胞比例在50%以上。