摘要
目的探讨低频超声体外介导神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)基因转染神经干细胞的适宜超声占空比条件。方法体外培养神经干细胞,在24孔板中加入200斗l微泡(浓度20%)和20μlpEGFP-NT-3基因重组质粒(1斗g/斗1)混合静置30min。将500山神经干细胞悬液(3×105/m1)加入到微泡和质粒混合液中,采用超声声强1.5W/cm^2,照射时间60s,占空比分别为10%、25%和50%。用1MHz超声探头辐照上述混合液,转染后用流式细胞仪检测各组细胞基因转染率,MrIT法检测神经干细胞存活率。空白对照组为未经超声辐照的质粒与神经干细胞混合物。结果随着超声占空比升高,细胞存活率逐渐降低。占空比为50%时,细胞存活率低于40%;占空比为25%时,细胞存活率高于60%,且基因转染率明显高于占空比10%和50%组,为(18.6±0.90)%。结论通过优化超声占空比条件,证明适宜的超声占空比为25%,神经干细胞转染率最高,且细胞损伤较小。
出处
《中华显微外科杂志》
CSCD
北大核心
2012年第4期307-309,I0008,共4页
Chinese Journal of Microsurgery
基金
深圳市科技计划重点项目(200901014)