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用LA-PCR方法克隆东方田鼠部分Y染色体序列 被引量:1

Exploring SNPs on ChrY of Microtus fortis
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摘要 目的克隆东方田鼠长江亚种(Microtus fortis calamorum)和宁夏指名亚种(Microtus fortis fortis)Y染色体的部分序列,并挖掘这两个亚种间的单核苷酸多态性位点(SNPs)。方法本研究利用依据Y染色体保守性靶标位点(YCATS)设计的引物,测得Y染色体上的8个内含子短片段序列,进而设计长片段PCR(LA—PCR)引物来获得相距几kb的两个内含子之间的长片段序列。结果获得东方田鼠长江亚种和宁夏指名亚种Y染色体上的7300bp序列,比对这两个亚种的序列后发现4个SNPs位点。结论获得了田鼠Y染色体上的7300bp序列和4个SNPs位点。 Objective To obtain the sequences of Y chromosome of Microtus fortis calamorum and Microtusfortisfortis, and find out some SNPs of these two subspecies. Methods Eight short segments' sequences involving in introns of ChrY are sequenced by using Y chromosome conserved anchored tagged primers, which would be used to design two new pairs of primers to achieve two long fragments of several kb in size through LA-PCR (Long and accurate polymerase chain reaction). Results About 7300 bp long on ChrY of M.f.calamorum and M.ffortis is obtained respectively, for the first time, and 4 SNPs by comparing the sequences of these two subspecies are obtained. Conclusion The 7300 bp sequences on Y chr and 4 SNPs are obtained.
出处 《实验动物与比较医学》 CAS 2012年第4期324-328,333,共6页 Laboratory Animal and Comparative Medicine
基金 上海市科技创新行动计划实验动物专项基金
关键词 东方田鼠 单核苷酸多态性位点 Y染色体保守性靶标位点 长片段PCR Microtusfortis Single nuclear polymorphism (SNP) Y chromosome conserved anchored tagged sequences (YCATS) Long and accurate polymerase chain reaction (LA-PCR)
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