狼尾草属牧草RAPD反应体系的建立与优化

利用RAPD技术对狼尾草属牧草进行种质资源遗传多样性研究中,对影响PCR扩增效果的一些因素诸如DNA的提取浓度、Taq酶的选择及其用量、Mg2+浓度、dNTPs的用量以及退火温度等指标进行反复筛选和优化,结合正交试验的结果,最终确定RAPD-PCR的反应体系为:总体积20μl,反应体系中含有1.5μl(25mM)Mg2+、0.4μl(10mM)dNTPs、1.2μl(10pM)primer、0.4μl(5U/μl)Taq DNA Polymerase、2.0μl10×PCR Buffer、2.0μl DNA模板,ddH2O补足到20μl。