摘要
目的检测内源性PS1在活体细胞膜上的定位及其表达。方法为防止细胞固定及通透使胞膜被破坏,在未经固定和通透的活体细胞上利用PS1抗体,通过间接免疫荧光法观察了内源性PS1在活细胞膜外表面的定位和表达;利用分子标签技术,构建GFP-PS1融合蛋白,瞬时转染细胞,检测到外源性PS1在细胞核膜的定位及在胞质中的少量分布;同时利用PS1抗体,将细胞固定及通透,用间接免疫荧光技术,检测到内源性PS1在细胞核膜中的定位及在细胞质中的少量不均匀分布。结果内源性PS1在定位于亚细胞结构的膜同时,也定位于细胞外膜。结论成功地在活体细胞外膜上检测到内源性PS1。
Objective To detect the membrane location of endogenous PS1 on live cells.Methods HEK293 and HeLa cells were transfected with fusion proteins by attaching GFP-PS1.The cellular location of endogenous and exogenous PS1was characterized with antibody by indirect immunofluorescence technique.Results Endogenous and exogenous PS1 was found on the nuclear membrane and a little and inhomogeneous distribution in cytoplasm.Conclusions Endogenous PS1 located on the outer membrane of the unfixed and live cells.
出处
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2012年第12期1400-1405,共6页
Basic and Clinical Medicine
基金
科学技术部"科技基础工作项目"(G99-E-01)