FKHRL-1基因转染对血管损伤后平滑肌细胞增殖能力的影响

目的观察FKHRL-1基因转染对颈总动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞增殖能力的影响。方法 21只雄性SD大鼠分成对照组(C1组)和球囊损伤组(S组),其中S组又分为损伤后0.5、1、2、3、6、12 h组(S1、S2、S3、S4、S5、S6组,n=3);S组大鼠均行左侧颈总动脉球囊损伤术,取损伤处血管组织培养平滑肌细胞,并采用RT-PCR技术检测FKHRL-1 mRNA表达、Western印迹法检测FKHRL-1蛋白表达。15只雄性SD大鼠行左侧颈总动脉球囊损伤术后分为正常对照组(C2组、n=5)、空白对照组(N组、n=5)和体外转染组(T组、n=5),取损伤后2 h的血管组织培养平滑肌细胞,采用Western印迹法检测质粒DNA的表达、MTT法检测细胞的增殖能力。结果颈动脉损伤后S3组血管平滑肌细胞的FKHRL-1磷酸化蛋白表达明显增强,与C1组和其他S组比较差异有统计学意义(P<0.01);脂质体LipofectAMINETM2000成功将质粒转染至损伤后血管平滑肌细胞中,转染后T组血管平滑肌细胞的增殖能力显著降低,与C2组和N组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。结论血管损伤后,FKHRL-1快速发生磷酸化、在损伤后2 h达到高峰,整个过程持续时间短;转染后FKHRL-1可在一定程度上抑制血管损伤后平滑肌细胞的增殖,提示非磷酸化FKHRL-1的含量升高可能在血管损伤后的修复过程中发挥重要作用。