鸭IFN-α成熟蛋白基因的克隆

干扰素（IFN）是一类能诱导产生多种广谱抗病毒蛋白的细胞因子．为了克隆樱桃谷鸭α干扰素成熟蛋白基因，从GenBank搜索出鸭α干扰素基因的序列，参照AY879230设计引物．利用PCR技术从鸭肝脏提取的基因组DNA扩增目的基因。将目的基因与pMD18-T我体进行连接，转化到大肠杆菌DH50α感受态细胞中．涂抹在含Amp＋的LB固体培养基上。应用蓝白斑筛选，挑选白斑接种到LB液体培养基中。提取重组质粒DNA，对质粒DNAPCR扩增和内切酶酶切鉴定为阳性的重组质粒进行测序。测序结果表明．鸭α干扰素成熟蛋白基因长度为486bp，为进一步研究鸭α干扰素基因表达、生物学活性和应用奠定基础。