评价微生物抗生素耐药性的遗传学方法

与常规的测定微生物敏感性的方法（平板扩散法、肉汤稀释法、琼脂稀释法和梯度扩散法）相比较，分析了评价微生物抗生素耐药性的遗传学方法的优缺点。详细介绍了从抗生素耐药基因和抗生素耐药性相关基因突变两方面检测微生物抗生素耐药性的遗传学方法，前者包括：（１）多聚酶链式反应（ＰＣＲ）扩增目标ＤＮＡ，用琼脂糖电泳、探针杂交技术或ＤＮＡ序列测定以确定扩增子；（２）分枝ＤＮＡ分析；（３）ＰＣＲ－限制性片段多态性（ＲＦＬＰ）分析。后者包括：（１）ＰＣＲ—ＲＦＬＰ分析；（２）ＰＣＲ－单链－致性多态性（ＳＣＣＰ）分析；（３）ＰＣＲ－裂解酶片段多态性（ＣＦＬＰ）分析；（４）ＰＣＲ—ＲＮＡ／ＲＮＡ双链核糖体酶切分析；（５）ＰＣＲ－通用型异源双倍体发生器分析；（６）ＰＣＲ－线性探针分析（ＬｉＰＡ）；（７）ＰＣＲ－分子信号序列分析；（８）硅微芯片上 ＤＮＡ寡核苷酸阵列分析。对以上方法进行全面、客观地评价，为临床应用提供理论指导。