柱前在线衍生-HPLC法测定大鼠脑脊液中天冬氨酸和谷氨酸的含量

目的测定大鼠脑脊液中天冬氨酸和谷氨酸的含量。方法采用HPLC法,以邻苯二甲醛为衍生试剂,色谱柱为Hypersil AA-ODS(2.1 mm×200 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05 mol/L乙酸钠溶液(冰乙酸调pH=6.0),梯度洗脱(0→15 min,乙腈0%→60%),流速0.5 mL/min,荧光检测(激发波长340 nm、发射波长450 nm),柱温为30℃。结果两者在5～200 pmol范围内线性关系良好,天冬氨酸的回收率为99.74%(RSD=2.55%),谷氨酸的回收率为102.1%(RSD=2.63%)。结论该方法简单、快速、准确,可用于单只大鼠脑脊液中氨基酸的测定。