大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞的分离培养与鉴定

目的探讨大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞分离、培养及鉴定的方法。方法解剖分离E14d大鼠胚胎腹侧中脑组织，经机械吹打制成单细胞悬液，接种于无血清培养基中培养，观察其增殖、分化并进行Nestin免疫细胞化学鉴定和诱导分化后β-Ⅲ-tubulin、GFAP、CNPase免疫细胞化学鉴定。结果原代培养7d后，可形成大量悬浮生长Nestin免疫阳性的神经球，经诱导分化后细胞呈GFAP、CNPase或β-Ⅲ-tubulin免疫阳性。结论建立大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞分离培养与鉴定的方法，为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础。