棉花曲叶病毒大基因间区启动子在宿主植物中的表达活性

棉花曲叶病毒（ＣＬＣｕＶ）是一种单链ＤＮＡ病毒，属于双生病毒亚组Ⅲ．为了研究其基因组大基因间区（ＬＩＲ）的功能，以ＣＬＣｕＶ侵染的烟草叶片组织总ＤＮＡ为模板，通过聚合酶链反应扩增ＬＩＲ并插入克隆载体．将ＬＩＲ分别以互补链及病毒链基因转录方向与ｇｕｓ报告基因和ｎｏｓ终止子融合，构建了植物表达载体．通过农杆菌介导的方法转化烟草并测定转化植株的ＧＵＳ活性，实验结果表明，ＬＩＲ在互补链基因方向具有强启动子活性， ＧＵＳ平均活性是ＣａＭＶ ３５Ｓ启动子的５～６倍，单株最高的ＧＵＳ活性达到ＣａＭＶ ３５Ｓ启动子的 １０倍；组织化学定位证实其在叶肉及维管组织均有活性． ＬＩＲ在病毒链基因方向的启动子活性较低．报道了ＣＬＣｕＶ来源的分离的ＬＩＲ在互补链基因方向可作为一种新型的强启动子元件应用于植物遗传操作．