摘要
通过PCR方法扩增出包含糖基化信号肽的猪瘟兔化弱毒疫苗株E0(Erns)蛋白基因,末端引入6×His标签序列,将其克隆到Bac-to-Bac杆状病毒表达系统pFastBacTMHT B载体中,将阳性重组质粒pF-E0转化DH10Bac感受态大肠杆菌,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,获得重组Bacmid质粒(rBac-E0)。转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒rAc-E0。经Western blot鉴定重组蛋白正确表达,且具有良好的抗原性;用糖苷酶PNGase F处理后重组蛋白分子量减小为32 ku,表明重组蛋白为糖基化蛋白。这为进一步研究E0蛋白的功能、亚单位疫苗和诊断试剂的开发奠定了基础。
出处
《畜牧与兽医》
北大核心
2013年第3期50-53,共4页
Animal Husbandry & Veterinary Medicine
基金
江苏省农业科技自主创新资金项目(SCX(12)5056)