Stat5a促进体外分离的泌乳期奶牛乳腺上皮细胞泌乳

Stat5a介导细胞外的细胞因子和生长因子进入乳腺上皮细胞核内,从而调节妊娠、泌乳和退化期乳腺基因的转录。然而,它在奶牛乳生产中的功能还需进一步研究。本试验分析了Stat5a对奶牛乳腺上皮细胞泌乳能力的影响。在质粒pcDNA3.1中插入了Stat5a基因,并用α-S1-casein 5'序列代替了CMV启动子,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1+-stat5a-αS1。真核表达载体pcDNA3.1+-stat5a-αS1稳定转染进入奶牛乳腺上皮细胞中,并用G418筛选。通过检测乳腺上皮细胞的增殖、活力、β-酪蛋白和Stat5a基因的表达,结果表明,在奶牛乳腺上皮细胞中,真核表达载体pcDNA3.1+-stat5a-αS1可以高效表达Stat5a,并增加细胞的泌乳能力。对Stat5a与营养素的关联性检测,结果显示,在转染pcDNA3.1+-stat5a-αS1的奶牛乳腺上皮细胞中,赖氨酸、蛋氨酸、乙酸钠、β羟丁酸钠和葡萄糖都增加了细胞的泌乳能力,同时,细胞的活力及β-酪蛋白、乳糖和甘油三酯的表达均有所增加。结果表明,营养素能够增加Stat5a基因的表达,从而提高奶牛乳腺上皮细胞泌乳。提示,Stat5a在泌乳和基因表达调控网络中具有重要作用。