奶山羊乳腺上皮细胞系的建立与鉴定

为了研究奶山羊乳腺的泌乳机理,试验建立了一个体外泌乳期奶山羊乳腺上皮细胞(DGMEC)系。取关中奶山羊泌乳35d的乳腺组织,分离并培养在含有表皮生长因子、胰岛素样生长因子-1、转铁蛋白和胎牛血清的培养基中。用0.25%胰蛋白酶反复消化,去除成纤维细胞并富集上皮细胞,用抗体cytokeratine18来鉴定上皮细胞源性。结果发现,DGMECs呈现单细胞层,鹅卵石,上皮样形态,并形成肺泡样和岛屿状结构,是乳腺上皮细胞的典型特征,且在这些细胞中可以观察到一个半对数生长曲线和脂滴。本试验还对DGMECs的泌乳功能进行了研究,结果表明,DGMECs能分泌乳糖和β-酪蛋白。在胰岛素处理48h后,细胞的泌乳功能无明显变化,而催乳素能显著提高乳蛋白和乳糖的分泌。