褪黑激素对增生性瘢痕成纤维细胞分泌转化生长因子β1的影响及其机制

目的 研究褪黑激素对增生性瘢痕Fb分泌TGF-β1的影响及机制。方法 采用组织块法分离培养人增生性瘢痕Fb,按随机数字表法将细胞分为褪黑激素组、褪黑激素＋Luzindole（褪黑激素受体拮抗剂）组、Luzindole组和对照组（仅以细胞培养液培养），前3组每孔细胞分别添加相应物质与细胞培养液培养，褪黑激素终浓度为1×10-3 mmol/L、Luzindole终浓度为1 mmol/L。 每组10个复孔。培养24 h，采用ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1含量，实时荧光定量PCR检测细胞TGF-β1、Smad 7和Rho激酶（ROCK）mRNA表达。对数据进行单因素方差分析或LSD-t检验或Kruskal-Wallis检验，组间比较采用Nemneyi法。结果 褪黑激素组Fb上清液中TGF-β1含量为（2.8±2.4）pg/mL，低于褪黑激素＋Luzindole组的（23.9±2.7）pg/mL、对照组的（28.9±2.0）pg/mL和Luzindole组的（24.9±2.8）pg/mL（F=94.58，P〈0.05）。褪黑激素组细胞TGF-β1 mRNA表达量为11.9±1.2，明显低于其他组（F=20.79，P〈0.05）；褪黑激素＋Luzindole组TGF-β1 mRNA表达量（14.9±1.8）与对照组（17.2±0.6）比较差异无统计学意义（t=0.806，P〉0.05）。褪黑激素组Fb Smad 7 mRNA表达量（0.076±0.080）明显高于对照组（0.023±0.024）、褪黑激素＋Luzindole组（0.026±0.026）、Luzindole组（0.037±0.021），χ2=9.567，P〈0.05。褪黑激素组ROCK mRNA的表达量明显低于对照组（0.002 30±0.002 70）、褪黑激素＋Luzindole组（0.001 30±0.001 20）和Luzindole组（0.001 10±0.001 20）， χ2=9.420，P〈0.05。结论 褪黑激素可通过与受体结合，上调瘢痕Fb中Smad 7表达、下调ROCK表达，从而抑制增生性瘢痕Fb表达TGF-β1。