N-乙酰半胱氨酸对大鼠心脏移植缺血再灌注损伤的保护作用

Protective effects of N-acetylcysteine on myocardial ischemia-reperfusion injury in the rat heart transplantation

目的观察N-乙酰半胱氨酸（NAC）预处理对心脏移植缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用。方法健康雄性Lewis大鼠100只和BN大鼠20只，随机分为3组：对照组：摘取供体心脏前30min或移植前30min，经下腔静脉注射生理盐水2ml；供体预处理组：摘取供心前30min，经下腔静脉注射NAC300mg／kg，受体不处理；受体预处理组：受体于移植前30min，经下腔静脉注射NAC300mg／kg，供体不处理。供心冷藏于4℃组氨酸-色氨酸-酮戊二酸（HTK）液18h后建立大鼠腹腔异位心脏移植模型（Lewis→Lewis）。使用Kaplan—meier分析其生存率（BN→Lewis）；分别于移植后6、24h取血测心肌酶学，再灌注24h取移植物检测超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化物（LPO）活性；光镜、电镜下观察心肌组织学及超微结构变化；免疫组织化学检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）蛋白表达；采用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）检测iNOS、eNOSmRNA表达。结果大鼠生存率NAC预处理组明显高于对照组；移植后6hNAC供体预处理组肌酸激酶MB同工酶（CK—MB）、乳酸脱氢酶（LDH）较对照组低[（10681．11±2052．01）、（4019．00±678．03）U／L比（31093．11±6822．67）、（8197±807．20）U／L，P〈0．05]，受体预处理组CK—MB、肌钙蛋白T（TnT）、LDH较对照组低[（12903．29±1789．46）U／L、（17．90±2．87）μg/L、（4235．17±585．88）U／L比（31093．11±6822．67）U／L、（49．51±6．41）ug／L、（8197．00±807．20）U／L。P〈0．05]。移植后24h供体预处理组TnT较对照组低[（11．08±1．53）μg/L比（20．28±2．90）μg/L，P〈0．05]，受体预处理组TnT、LDH较对照组低[（7．06±0．71）μg/L、（774．00±113．13）U／L比（20．28±2．90）μg/L、（1619．50±289．11）U／L，P〈0．05]；移植后24h，LPO活性较对照组降低[（9．48±1．05）／（7．82±1．56）比（10．90±2．28）μmol／L]，SOD活性增高[（4．71±1．09）／（4．57±1．09）比（2．38±0．39）U／ml，P〈0．05]。心肌组织学及超微结构的损伤程度显示NAC预处理组较对照组明显减轻；iNOS蛋白表达和mRNA表达供体预处理组和受体预处理组较对照组减低[（1．50±0．22）／（1．63±0．26）比（3．00±0．15），（0．95±0．41）／（0．43±0．17）比（1．00±0．41）]；eNOS蛋白表达和mRNA表达供体预处理组和受体预处理组较对照组升高[（3．60±0．16）／（3．40±0．26）比（2．00±0．21），（3．06±1．47）／（1．48±0．53）比（1．00±0．65），P〈0．05]。结论在大鼠心脏移植中NAC对供心IRI具有保护作用，其主要是通过直接抗氧化及提高氧化酶活性来减少心肌细胞损伤，从而减轻心肌IRI。

Objective To explore the protective effect of N-acetylcysteine （NAC） on graft ischemia-reperfusion injury （IRI） in the rat heart transplantation. Methods 100 healthy male Lewis rats and 20 healthy male BN rats were randomly divided into four groups. In c, ontrol group, 2 ml normal saline was infused via the inferior vena cava 30 rain before donor harvest or implantation. In donor preconditioning group, NAC （300 mg/kg body weight, iv. ） was infused via the inferior vena cava 30 min before donor harvest, and the recipient was not processed. In recipient preconditioning group, NAC （300 mg/kg body weight, iv. ） was infused via the inferior vena cava 30 min before recipient implantation,