表浅性膀胱癌细胞中DNA核酸内切酶ERCC1及膜连蛋白-1的表达及与顺铂耐药的关系

目的探讨表浅性膀胱癌细胞中DNA核酸内切酶ERCC1基因的表达在介导顺铂(Cisplatin)耐药中的作用。方法用分步诱导法在体外建立耐Cisplatin不同浓度、不同天数表浅性膀胱癌细胞KU7和253JB-V(0 nmol/L,0 d;0.4 nmol/L,30、75 d;0.8 nmol/L,30 d)和T24(0 nmol/L,0 d;0.2 nmol/L,90 d)。MTT方法检测Cisplatin对建立的耐药株细胞系的半数抑制浓度(IC50);RT-PCR方法检测ERCC1、膜连蛋白-1(Annexin-1)mRNA的表达变化。结果 MTT结果显示:Cisplatin作用96 h后,耐药株细胞的耐药程度明显增强;对KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞和T24耐药株细胞而言,KU7+0.4 nmol/L Cisplatin(75 d)和KU7+Cisplatin 0.8 nmol/L(30 d)对Cisplatin的敏感性下降,其IC50由0.8 nmol/L(0 nmol/L,0 d)逐步增高到1.45 nmol/L;同样的情况也发生在253JB-V耐药株细胞和T24耐药株细胞中。RT-PCR结果显示:KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞的ERCC1 mRNA表达增多,且在高浓度和天数多时更为明显,Annexin-1基因无明显变化。T24耐药株细胞中ERCC1基因及An-nexin-1基因均无明显变化。结论成功地在体外诱导了耐Cisplatin不同浓度的KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞各两株,T24耐药株细胞一株。其中KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞ERCC1基因的表达量随着加药浓度和天数的增加而增多,Annexin-1基因无明显变化。T24耐药株细胞的ERCC1基因及Annexin-1基因表达均无明显的变化。