TNF-α对肠上皮细胞通透性的影响及其NF—κB／MLC—P调控途径的研究

【目的】探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人肠上皮细胞问通透性的影响及作用机制。【方法】利用Caeo-2细胞建立肠上皮细胞屏障模型；分为对照组和NF—κB抑制组，分别为转染了空载质粒（vector）和DN—MuikBa质粒的Caco-2细胞，两组经TNF-α预处理后，应用电阻仪测定各组跨上皮细胞电阻（TEER）变化，罗丹明-鬼笔环肽直接染色观察细胞骨架改变，同时采用荧光素酶报告基因检测NF—κB活性，免疫印迹法检测肌球蛋白轻链（MLC）磷酸化水平。【结果】TNF-α活化NF-κB，引起F-actin（细胞骨架蛋白）重排，MLC磷酸化水平增高，细胞通透性增加；反之，抑制NF-KB活化，上述作用被明显抑制。【结论]TNF-α导致Caco-2细胞间的通透性增加，其机制可能与NF—κB活化，F—actin重排及MLC磷酸化有关。