Rv3872/CFP-10/ESAT-6融合蛋白的人工合成及表达

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摘要根据牛分枝杆菌AF2122/97基因组中Rv3872、CFP-1O和ESAT-6全长基因序列,以柔性linke(rG4S)3,将三基因序列进行串联,形成表达基因盒(Rv3872-CFP1O-ESAT6,RCE),人工合成并克隆于PUC57转移载体上(PUC57-RCE)。经EcoRI和HindIII双酶切PUC57-RCE,回收纯化RCE片段,与经过相同双酶切的pET-28a载体,于16℃水浴连接过夜,连接产物转化大肠杆菌DH5a感受态细胞,重组质粒经培养鉴定,测序结果证实插入的REC片段序列编码和方向与预期一致。在优化的诱导条件下表达蛋白,分段收集样本,并各取少量进行SDS-PAGE,经Western-blot分析显示,融合蛋白RCE具有较好的免疫原性,与阳性牛血清在35kDa位置处有明显的反应带。

作者王楠付延军赵子丰王春华王晓锋

机构地区吉林省动物疫病预防控制中心吉林市农科院吉林正业生物制品股份有限公司

出处《吉林畜牧兽医》 2013年第6期33-35,共3页 Jilin Animal Husbandry and Veterinary Medicine

关键词奶牛结核病融合蛋白 Rv3872 CFP-10 ESAT-6 人工合成表达

分类号 S852.618 [农业科学—基础兽医学]

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